周慧敏1967年出生于香港，中学毕业参加新秀选拔，1985年进入娱乐圈。1986年任职香港电台DJ。1991年晋身歌坛加入宝丽金唱片公司，因气质清纯温柔，美丽动人，1990年代初被封为香港“玉女掌门人”，事业平步青云。曾接拍电影有《赤子雄风》、《精装追女仔3》、《三人新世界》、《富贵吉祥》、《蓝江传》、《我爱法拉利》等。出演的电视剧集有《武林幸运星》、《大时代》、《刀马旦》、《中神通王重阳》等。
1989年，周慧敏与倪震相识而相恋。生于1964年的倪震是香港著名作家倪匡之子，而他的姑姑就是香港“师太”亦舒，倪震自己也是集作家、电台DJ、演员和出版人于一身的风流才子。周慧敏1997年正式告别娱乐圈，随倪震赴加拿大定居。2006年，周慧敏举行复出演唱会。
2008年底，男友倪震被曝光“湿吻事件”，俩人经历“引咎分手”事件后，突然于2009年1月宣布结婚，婚后的周慧敏宣布不会要小孩。